基因芯片法检测122名聋哑患者耳聋基因异常

张小盒 · 发表于 2014-12-10 17:49

立题依据及目的：耳聋是影响人类健康和造成人类残疾最常见的原因。在我国每年3000多万的新生儿中，每1000个新生儿当中就有2个多是重度聋儿，其中一半左右是遗传性耳聋，另外在大量迟发性听力下降患者当中，亦有许多患者由于自身的基因缺陷而致病。甚至在正常人群中也有6%以上的人的是耳聋致病基因的携带者，这意味着，正常人也有一定几率生育出耳聋的孩子。在以往，临床医生对于耳聋的预防可采取的办法很少，而且效果不佳。但是基因科学的发展使耳聋基因的检测变为现实，而耳聋的基因检测是能够做到耳聋“早发现、早预防、早治疗”的最有效的高科技手段。据国内相关报导，我们已经知道引起耳聋的常见基因包括GJB2基因、线粒体 DNA A1555G基因、PDS基因等。这些基因均为重点的致聋基因或致突变基因。GJB2基因和先天性聋有着密切关系。中国先天性聋患者中携带有GJB2基因突变的约占20％。线粒体DNA A1555G基因突变与链霉素、庆大霉素、卡那霉素等氨基糖甙类药物引起的药物性耳聋有着密切关系。PDS基因突变可以导致大前庭水管综合征，临床上表现为先天性或后天性耳聋，耳聋发生或加重与外伤、感冒有关。这三种基因引起的遗传性耳聋约占整个遗传性耳聋的50％左右。我们对长春地区122例非综合征型耳聋儿童进行GJB2，GJB3,PDS,MtDNA常见遗传性耳聋基因的诊断，为未来的家庭、婚育进行分子生物学方面的指导。
方法：采用问卷调查方式，对131例长春地区的聋儿进行基本情况及耳聋相关信息的调查；采集122名（其中9个遗传性耳聋家系）非综合征型聋儿的新鲜血液，枸橼酸钠抗凝，并应用NucleoSpin Blood DNA提取试剂盒提取患儿的DNA；利用晶芯®遗传性耳聋基因检测芯片试剂盒对提取的DNA进行GJB2 35delG、176del16、235delC、299delAT，GJB3 538C>T、547G>A ,PDS 2168 A > G 、IVS7-2 A > G，MtDNA 1494 C > T、1555 A > G十个突变位点的检测。
结果：1、所有参与调查的131人中，122例确定为非综合征型耳聋患儿，1例外耳畸形，1例Waardenburg综合征，7例患儿母亲孕初期受病毒感染。
2、有明确聋前耳毒药用药史的患儿有45例，其中单独用药以庆大霉素最多见，有17例，单独用链霉素、小诺霉素分别为3例、2例，庆大霉素与链霉素合用2例，庆大霉素与小诺霉素合用1例，庆大霉素与卡那霉素合用1例，应用水杨酸类药物2例，用药史不详者17例。
3、在所有参加检测的耳聋儿童中，发现存在有GJB2基因突变的有36人（29.51%），其中纯合突变者12例，包括：176del16纯合突变1例, 235delC纯合突变10例，299delAT纯合突变1例；杂合突变者9例，包括： 35 delG杂合突变1例， 176del16杂合突变1例，235delC杂合突变7例；复合突变15例，包括：176del16杂合突变伴235delC杂合突变3例, 235delC杂合突变伴299delAT杂合突变12例。另有1例235delC杂合突变伴299delAT杂合突变伴MtDNA C1494T突变。存在有PDS基因突变的有25人(20.49%)，其中IVS7-2A>G纯合突变8例，杂合突变10例，2168A>G杂合突变1例，二者复合突变5例。存在有GJB3基因538C>T杂合突变1例。
结论：1、长春地区耳聋儿童中，能得到明确分子学诊断的占总体的51.64％，其中GJB2基因占耳聋儿童的29.51％，PDS基因占耳聋儿童的20.49%，MtDNA及GJB3基因的突变频率<1%。
2、在长春地区的耳聋儿童中，GJB2基因的突变频率较高，高于国内的其他地区，PDS基因突变频率与国内其他地区相平，而GJB3及线粒体基因突变频率较低。