实时定量RT-PCR方法检测喉鳞癌颈淋巴结隐匿性微转移的实验研究

张小盒 · 发表于 2014-12-10 17:25

[摘要]
　目的：探讨建立一种基于实时定量RT-PCR技术（real-time quantitative RT-PCR，real-time qRT-PCR）的喉鳞癌淋巴结微转移检测方法，寻找具有特异性和敏感性的肿瘤标记物。
方法：以21例喉鳞癌患者的选择性颈清扫术后77个淋巴结分区中563个淋巴结标本为研究对象，采用real-time qRT-PCR技术定量检测各区淋巴结中细胞角蛋白19（cytokeratin 19，CK19）、鳞状细胞癌相关抗原（squmaous cell carcinoma antigen，SCCA）和寻常天疱疮抗原（pemphigus vulgaris antigen，PVA）的表达，并与常规病理（H&E染色）和免疫组化（immunohistochemistry，IHC）检测的结果进行对照分析。
结果：IHC与常规H&E染色检测结果无显著差异（p>0.05）。三种标记物在全部淋巴结标本中的阳性检出率均明显高于常规H&E染色，有显著性差异（p<0.01）；常规病理阳性的淋巴结标本中的三种标记物的表达量明显高于常规病理阴性标本的表达量，有显著性差异（p<0.01）。
结论：IHC与常规H&E染色具有相似的微转移检出效率；应用real-time qRT-PCR技术对喉鳞癌患者颈部淋巴结标本中的CK19、SCCA和PVA三种标记物进行检测，是一种可提高检测喉鳞癌颈淋巴结微转移敏感性和特异性的可行性方法。
[关键词]　喉鳞癌；细胞角蛋白19；鳞状细胞癌相关抗原；寻常天疱疮抗原；实时定量逆转录聚合酶链反应；微转移