防腐剂苯扎氯铵和山梨酸钾对纤毛摆动频率的影响

张小盒 · 发表于 2014-12-5 09:32

背景：防腐剂是多剂量水性介质鼻用制剂不可或缺的组成部分。近年来人们发现防腐剂可能会对呼吸道黏膜功能产生不良影响。本文对以苯扎氯铵和山梨酸钾为代表的防腐剂对鼻黏膜功能的影响进行了研究。
目的：在兔呼吸道黏膜上皮纤毛模型中评价苯扎氯铵和山梨酸钾不同浓度对纤毛摆动频率（CBF）的影响。
方法：制备鼠尾胶原并铺片，以鼠尾胶原贴附底物组织块培养法培养兔呼吸道黏膜上皮纤毛细胞。培养7天后，采用加有羟乙基哌嗪乙磺酸的Hanks平衡盐溶液（sHBSS）作为对照，观察纤毛细胞暴露于0.01%(w/v)、0.0075%(w/v)、0.005%(w/v)苯扎氯铵和0.96%(w/v)、0.48%(w/v)、0.24%(w/v)、0.12%(w/v)山梨酸钾后CBF在10分钟内的变化，并进行统计学分析。
结果：在10分钟暴露期间，sHBSS对CBF没有明显影响，到暴露后10分钟时CBF为基线CBF的91.6±6.8%（P > 0.05）。苯扎氯铵呈剂量依赖性地抑制CBF。与sHBSS组（n = 14）相比，0.005% BKC组（n = 13）在给药后3分钟时导致CBF增加42.2％（P < 0.05），随后二组间差异逐渐缩小，到给药后10分钟时相差13.4%（P < 0.05）。在0.0075% BKC组（n = 13），给药后导致CBF随时间急剧下降，到给药后10分钟时与基线相比平均CBF下降了90.3％（P < 0.01）。在该剂量水平下暴露10分钟后，10/13个纤毛细胞的纤毛已停止摆动。在0.01% BKC组，到暴露后3分钟时，2／13只细胞纤毛停止摆动，到第5分钟时，12/13只细胞停止摆动，到第6分钟时全部细胞停止摆动。
山梨酸钾对CBF的影响不明显。在0.12～0.96%浓度范围内有CBF随PS浓度升高而增加的趋势。在10分钟暴露期间，低剂量组（0.12%）给药后引起CBF轻微下降，到暴露后10分钟时与基线相比CBF下降了13.0%，但与sHBSS对照组相比无统计学意义。0.24、0.48和0.96% PS给药后引起CBF增加，到暴露后10分钟时分别为基线CBF的105.5 ± 9.8、107.6 ± 4.0和117.1 ± 9.5（与sHBSS对照组相比，P < 0.01）。
讨论：试验结果显示CBF对BKC的浓度变化极为敏感，在0.01%水平下BKC迅速抑制纤毛摆动，而当浓度减少一倍（即0.005%）时仅对纤毛摆动产生轻微刺激。由于鼻用制剂中BKC作为防腐剂常用的浓度是0.01%，药物应用于鼻部后通常会被黏液毯或分泌物稀释，因此，这可能解释了临床上往往未观察到BKC所致副作用的原因。PS在浓度高达0.96%（鼻用制剂中的常用浓度为0.12%）下仅引起CBF轻微增加，表明PS是一种较为安全的防腐剂。