构建组织工程化鼓膜的新型种子细胞——脂肪干细胞体外实验性研究

张小盒 · 发表于 2014-12-2 20:34

摘要：
研究背景：鼓膜是听觉器官中重要的传音结构之一。鼓膜各种异常中以鼓膜穿孔最为常见，据初步统计，我国鼓膜穿孔患者约有4000多万人，全世界平均发病率约达3%。目前，组织移植手术仍是治疗鼓膜破裂、穿孔的主要方法。近年来，脂肪干细胞（adipose-derived stem cells, ASCs）被认为是组织工程领域最有前景的种子细胞，具有来源丰富，取材、分离过程简便，无伦理局限性等优势。作为间充质干细胞中重要一员，ASCs具有跨胚层分化（cross-differentiation）的潜能，而且体外培养的ASCs可长期稳定保持对数增长且不易老化。另外， ASCs还具有旁分泌的功能，可以分泌多种胶原，纤维连接素及生长因子，能间接促进移植物成活。ASCs与目前广为应用的骨髓间充质干细胞（bone marrow–derived mesenchymal stem cells, BMSCs）一样不表达人类白细胞抗原（HLA-DR），从而避免了移植物抗宿主反应。体外ASCs分离提取率远高于BMSCs，脂肪组织内可收获高达2%的ASCs，而骨髓组织内仅能得到0.002%的BMSCs。基于以上研究背景，本研究将初步探讨以脂肪干细胞作构建组织工程化鼓膜种子细胞的可行性。
目的：探讨脂肪干细胞对鼓膜上皮细胞和成纤维细胞增殖和迁移的作用
方法：以豚鼠为研究对象，分离鼓膜上皮细胞、鼓膜成纤维细胞以及脂肪干细胞；鼓膜上皮细胞与成纤维细胞分别与脂肪干细胞共培养，以CCK-8方法检测脂肪干细胞对两种细胞增殖作用；以Transwell法及细胞划痕法检测脂肪干细胞对两种细胞迁移速度的影响。
结果：脂肪干细胞在体外能明显促进鼓膜上皮细胞和鼓膜成纤维细胞的增值和迁移。
结论：以脂肪干细胞作为种子细胞将加速原有鼓膜穿孔边缘上皮化和纤维化速度，将更有利于鼓膜的损伤愈合；脂肪干细胞有望成为构建组织工程化鼓膜最有潜力的种子细胞。