Stat3反义寡核苷酸对喉癌Hep2细胞放疗增敏作用的分子机制

张小盒

【摘要】
    目的：探讨Stat3反义寡核苷酸（antisense oligodeoxynucleotides, ASODN）联合放疗对喉癌Hep-2细胞的作用及其机制。
    方法：Hep-2细胞株传代培养，分别进行以下处理：无处理、5Gy60GO照射、不同浓度Stat3ASODN转染Hep-2细胞、不同浓度Stat3ASODN转染联合放疗，倒置荧光显微镜下观察细胞形态学改变。结晶紫法检测各组作用24h后的细胞增殖抑制率。流式细胞学检测不同浓度Stat3ASODN转染联合放疗后细胞周期的变化及不同浓度Stat3ASODN转染组、200nmol/lStat3ASODN转染组联合放疗前后对stat3、p-stat3、cyclinD1、p21、cdk4蛋白表达的影响。
    结果：荧光显微镜下Stat3ASODN转染联合放疗组细胞形态改变显著，出现明显的病变。对细胞增殖抑制的作用差异显著，与单纯放疗和单纯ASODN转染组相比具有统计学意义（P＜0.01）。流式细胞学检测显示：随着Stat3ASODN转染浓度的增加，Hep-2细胞G0/G1期比例上升,S期比例下降；Stat3、p-stat3及cyclinD1、cdk4蛋白荧光指数呈一致性降低趋势，而p21蛋白荧光指数呈升高趋势，其中stat3、p-stat3、p21蛋白表达组间差别具有统计学意义（P＜0.05）。Pearson相关性分析结果显示：stat3与p-stat3呈显著正相关（r=0.986 P＜0.01）、与cdk4呈显著正相关（r=0.910 P＜0.05），与p21呈负相关（r=-0.981 P＜0.05）；p-stat3与cdk4呈正相关（r=0.949 P＜0.05），与p21呈负相关（r=-0.917 P＜0.05）；p21与cdk4之间呈现一定的负相关性（r=-0.973 P＜0.01）；细胞抑制率的变化与stat3、p-stat3蛋白荧光指数的变化呈负相关（r=-0.989  r=-0.971  p＜0.01）。
    结论：STAT3ASODN转染喉癌Hep-2细胞，通过下调STAT3蛋白的表达而对细胞周期蛋白进行调控，从而引起细胞周期分布的改变，达到增强放疗敏感性的作用。
【关键词】STAT3；喉癌；反义寡核苷酸；放疗；细胞周期