强次声诱导的豚鼠内耳毛细胞凋亡的研究

张小盒 · 发表于 2014-12-10 17:51

目的：研究强次声诱导的豚鼠内耳毛细胞凋亡。
方法：20只豚鼠随机等分为4组，每组5只，其中5只作为对照。将豚鼠置于频率8Hz的次声声场中连续暴露90min，次声强度为125dB SPL，分别于次声暴露前及暴露后即刻（2h 内）、2天和5天时取材，常规耳蜗基底膜铺片，应用原位末端标记技术（TUNEL）做荧光染色，共聚焦显微镜下观察和照像。
结果：次声暴露后1天组和2天组均未见毛细胞凋亡，5天组耳蜗底回和中回动物均可见外毛细胞凋亡染色阳性，并出现细胞的明显肿胀和细胞界限不清。
讨论：细胞凋亡是细胞在基因调控下程序性死亡的方式, 是生命的基本现象之一,也是噪声性耳蜗损伤的途径之一。。已有研究发现高频噪声能诱发细胞凋亡，我们先前的研究发现次声能明显降低豚鼠耳蜗毛细胞功能，并能引起毛细胞的超微结构改变，但次声能否诱导毛细胞凋亡尚不清楚。研究次声诱导的内耳毛细胞凋亡对探讨其损伤机制和评估各种防治因素的效果具有重要意义。原位末端标记技术—TUNEL法是分子生物学与形态学相结合的研究方法,可对完整的单个凋亡细胞或凋亡小体进行原位染色,能准确反映细胞凋亡最典型的生物化学和形态特征。本实验研究发现强次声可诱导豚鼠耳蜗毛细胞的凋亡，且凋亡的发生为迟发性的，此结果与脉冲噪声损伤后早期即出现毛细胞凋亡的特点有所不同。关于次声诱导的内耳毛细胞凋亡调控因子的表达有待进一步研究。