表皮生长因子受体信号通路在人鼻腔上皮RPMI-2650细胞中作用的实验研究

张小盒

目的  通过对表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor, EGFR）信号通路不同部位的干预，观察体外培养的人鼻腔上皮细胞RPMI-2650中EGFR和黏蛋白5AC（mucin 5AC, MUC5AC）的变化。方法  对人鼻腔上皮细胞RPMI-2650进行体外培养，记录生长曲线，并行扫描电镜观察细胞超微结构。当细胞大部分融合时，将细胞分为四组，A组：在原Eagle最小必需培养基（Eagle΄s Minimum Essential Media，EMEM）培液中继续培养；B组：加入人重组表皮生长因子（epidermal growth factor，EGF）25 ng/ml；C组：加入AG1478（EGFR选择性抑制剂）10 μmol/L，30 min后加入人重组EGF 25 ng/ml；D组：加入PD98059（p44/42MAPK选择性抑制剂）30 μmol/L，30 min后加入人重组EGF 25 ng/ml。以上四组细胞均继续培养24 h后，分别进行细胞免疫和Western Blotting实验，观察EGFR和MUC5AC蛋白在各组细胞中的表达。结果  细胞在培养第3天开始融合，第5～7天大量融合。扫描电镜可见细胞呈圆形或椭圆形，表面覆有大量微绒毛，当细胞融合时可变为梭形或多角形生长。EGFR蛋白在B组细胞中有强表达，A组和D组细胞中有较强表达，而在C组中仅有弱表达，A、B、D组与C组平均吸光度值（A值）相比差异均具有统计学意义（P＜0.01）。而MUC5AC蛋白在B组细胞中有强表达，A组细胞中有较强表达，在C组和D组中仅为弱表达，B组与C、D组间相比吸光度值差异均具有统计学意义（P＜0.01），而C组与D组之间并无显著差异（P＞0.05）。结论  从细胞和蛋白水平上发现，EGFR信号通路在RPMI-2650细胞中发挥作用。对该通路不同部位进行干预，细胞中EGFR和MUC5AC蛋白随之发生相应改变。证实了EGFR信号通路在鼻腔上皮细胞RPMI-2650中对MUC的分泌具有调节作用。

锦心素颜

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程觉

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